MicroRNA-Expressions- und DNA-Methylierungsuntersuchungen im Primärtumor und Rezidiv des Glioblastoma multiforme

Abstract

Die vorliegende Arbeit untersuchte miRNA-Expressionen und DNA-Methylierung im Primärtumor und Rezidiv des Glioblastoma multiforme. Ziel der Studie war es, epigenetische Prozesse im Glioblastom und ihre Auswirkungen auf den Verlauf dieser Erkrankung zu analysieren. Es wurden Proben eines Primärtumors und des zugehörigen Rezidivs von Glioblastomen von 19 Patienten, die im Zeitraum von 2006 bis 2015 entnommen wurden, untersucht. Die Expressionsraten der miRNA-21, -24, -26a und -181d wurden mit quantitativer Real-Time PCR bestimmt. Der Methylierungsstatus von p15, p16 und MGMT wurde durch methylierungsspezifische PCR analysiert. Für die miRNA-181d zeigte sich eine signifikant höhere Expressionsrate im Primärtumor als im Rezidiv und könnte somit ein epigenetischer Marker für die Krankheitsprogression sein. Für miRNA-21, -24 und -26a waren keine signifikanten Veränderungen der Expression im Vergleich von Primär- und Rezidivtumor nachweisbar. Bei keiner der untersuchten miRNAs waren signifikante Korrelationen zwischen den Expressionsraten und der klinischen Progression nachweisbar. Ein methylierter MGMT- Status zeigte sich im Verlauf der Erkrankung meist stabil. Es zeigten sich keine signifikanten Korrelationen der Methylierungsstatus von p15 und p16 mit dem klinischen Verlauf. Unsere Ergebnisse lassen vermuten, dass methylierte p15- und p16-Status bei Krankheitsprogression zu unmethylierten Status konvertieren und sich daraus neue Möglichkeiten für die Verlaufskontrolle einer Glioblastomerkrankung ergeben könnten.

The present work investigated miRNA expressions and DNA methylation in primary and reccurent glioblastoma multiforme. The aim of the study was to analyze epigenetic processes and their impact on the course of glioblastoma disease. Primary and recurrent tumor material was sampled from 19 patients between 2006 and 2015. The expression rates of miRNA-21, -24, -26a and -181d were analyzed by quantitative real- time PCR, the methylation status of p15, p16 and MGMT by methylation-specific PCR. For miRNAs, miRNA-181d expression level in primary tumor was found to be significantly higher than in recurrent tumors and could be an epigenetic marker for disease progression. There were no significant changes in the expression levels of miRNA-21, -24, and -26 when comparing primary and recurrent tumors. For all other miRNAs correlation analysis of expression rates and clinical progression was inconclusive. For methylation status, a methylated MGMT status was mostly stable during the progression of the disease. No significant correlations of the methylation status of p15 and p16 with the clinical course were found. Our results suggest that methylated p15 and p16 status convert to unmethylated status upon disease progression. This may open up new possibilities for monitoring the progression of glioblastoma disease.