Immunhistochemische Untersuchung über die Verteilung und Colokalisation von TRPV1, TRPA1 sowie FcεRI innerhalb der Mastzellpopulationen im Haus-staubmilben-Mausmodell für allergische Atemwegsentzündung

Abstract

Gegenstand der hier vorgestellten Arbeit ist die Rolle dreier Rezeptoren (TRPV1, TRPA1, FcεRI) in der Pathogenese allergischen Asthmas. Die Behandlung aller Mäuse erfolgt nach dem gleichen Protokoll eines HDM-Mausmodells mit der Zielsetzung, ein möglichst mit den Mechanismen der Natur vergleichbares allergisches Asthma auszu-lösen. Dabei nutzt die vorliegende Arbeit sowohl Lichtmikroskopie als auch ELISA, um die Unterschiede zwischen TRPV1-/--Mäusen und Kontrollgruppe zu quantifizieren, ins-besondere wird jedoch mit immunhistochemischen Färbungen gearbeitet. Bei der Analyse der BAL zeigt sich eine deutliche Zunahme der Zahl eosinophiler Gra-nulozyten HDM-behandelter Tiere und bei der Untersuchung der Spiegel an Immunglo-bulin E im Blut mittels ELISA findet sich eine signifikant gesteigerte Eosinophilie dersel-ben. Dabei findet sich kein Unterschied zwischen TRPV1-/- und Kontrollgruppen-Mastzellen. Eine Rolle kann jedoch angenommen werden für den TRPA1-Rezeptor und den hochaf-finen Mastzellrezeptor FcεRI. So können in bis zu 90% der Lungenmastzellen immun-histochemisch der Rezeptor FcεRI und in bis zu 80% der TRPA1-Rezeptor angefärbt werden, weiterhin kann demonstriert werden, dass TRPA1 auf Lungenmastzellen HDM-behandelter Mäuse vermindert und bei TRPV1-/-- C57BL6/J vermehrt nachweisbar ist. Diese Arbeit trägt somit dazu bei, die Rolle dieser Kanäle in Mastzellen im Rahmen von allergischem Asthma weiter einzugrenzen. Dabei rückt sie weiter ab von dem bisher vielfach postulierten TRPV1-Rezeptor und weist eher auf eine Rolle des strukturell ver-wandten, aber funktionell distinkten TRPA1-Rezeptors hin. Sie legt damit die Grundlage für weitere Untersuchungen, um dessen genaue Funktion weiter zu klassifizieren.

The subject of this work is the role which the 3 receptors TRPV1, TRPA1 and FcεRI play in the pathogenesis of allergic asthma. Every mouse was treated following the same protocol, an HDM-mice-model, aiming to cause allergic asthma. In doing this, the present work uses as well light microscopy as also ELISA to quantify the differences between TRPV1-/--mice and the control group, although mainly it used immunohistochemical colorations. In analysing the BAL, a significant increase in the number of eosinophilic Granulocytes was demonstrated in animals which were treated with HDM and regarding the levels of immunoglobulin E in the blood of the animals using ELISA a significant increase in HDMtreated mice can be noted. There is no difference visible between TRPV1-/--mast cells and the controls. An important role can be assumed for the the high-affinity IgE receptor FcεRI and the TRPA1-receptor, though. FcεRI can be stained immunohistochemically in up to 90% of mast cells in the lung and TRPA1 in up to 80%. Furthermore it can be demonstrated, that in the asthma-control-group TRPA1 is expressed to a lesser extent, but in TRPV1-/- - C57BL6/J significantly more. Hence, this work helps in narrowing down the role of these channels in allergic asthma. In doing so it moves away from the TRPV1-channel and suggests a major role of the structurally related, but functionally different TRPA1-channel. Thereby, it lays the foundation for further studies to classify this role more precisely.