Bitte benutzen Sie diese Referenz, um auf diese Ressource zu verweisen: doi:10.22028/D291-39559
Titel: Refined protocols of tamoxifen injection for inducible DNA recombination in mouse astroglia
VerfasserIn: Jahn, Hannah M.
Kasakow, Carmen V.
Helfer, Andreas
Michely, Julian
Verkhratsky, Alexei
Maurer, Hans H.
Scheller, Anja
Kirchhoff, Frank
Sprache: Englisch
Titel: Scientific Reports
Bandnummer: 8
Heft: 1
Verlag/Plattform: Springer Nature
Erscheinungsjahr: 2018
Freie Schlagwörter: Astrocyte
Gene expression
DDC-Sachgruppe: 610 Medizin, Gesundheit
Dokumenttyp: Journalartikel / Zeitschriftenartikel
Abstract: Inducible DNA recombination of foxed alleles in vivo by liver metabolites of tamoxifen (TAM) is an important tool to study gene functions. Here, we describe protocols for optimal DNA recombination in astrocytes, based on the GLAST-CreERT2/loxP system. In addition, we demonstrate that quantifcation of genomic recombination allows to determine the proportion of cell types in various brain regions. We analyzed the presence and clearance of TAM and its metabolites (N-desmethyl-tamoxifen, 4-hydroxytamoxifen and endoxifen) in brain and serum of mice by liquid chromatographic-high resolution-tandem mass spectrometry (LC-HR-MS/MS) and assessed optimal injection protocols by quantitative RT-PCR of several foxed target genes (p2ry1, gria1, gabbr1 and Rosa26-tdTomato locus). Maximal recombination could be achieved in cortex and cerebellum by single daily injections for fve and three consecutive days, respectively. Furthermore, quantifying the loss of foxed alleles predicted the percentage of GLAST-positive cells (astroglia) per brain region. We found that astrocytes contributed 20 to 30% of the total cell number in cortex, hippocampus, brainstem and optic nerve, while in the cerebellum Bergmann glia, velate astrocytes and white matter astrocytes accounted only for 8% of all cells.
DOI der Erstveröffentlichung: 10.1038/s41598-018-24085-9
URL der Erstveröffentlichung: https://www.nature.com/articles/s41598-018-24085-9
Link zu diesem Datensatz: urn:nbn:de:bsz:291--ds-395590
hdl:20.500.11880/35654
http://dx.doi.org/10.22028/D291-39559
ISSN: 2045-2322
Datum des Eintrags: 17-Apr-2023
Bezeichnung des in Beziehung stehenden Objekts: Supplementary information
In Beziehung stehendes Objekt: https://static-content.springer.com/esm/art%3A10.1038%2Fs41598-018-24085-9/MediaObjects/41598_2018_24085_MOESM1_ESM.pdf
Fakultät: M - Medizinische Fakultät
Fachrichtung: M - Experimentelle und Klinische Pharmakologie und Toxikologie
M - Physiologie
Professur: M - Prof. Dr. Frank Kirchhoff
M - Keiner Professur zugeordnet
Sammlung:SciDok - Der Wissenschaftsserver der Universität des Saarlandes

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