Bitte benutzen Sie diese Referenz, um auf diese Ressource zu verweisen: doi:10.22028/D291-22900
Titel: Entwurf und Aufbau eines chipbasierten Selektionssystems für die Klonierung therapeutisch relevanter Produktionszellen
Sonstige Titel: The design and buildup of a chip-based selection system for cloning of therapeutic relevant cells
Verfasser: Kurz, Christian
Sprache: Deutsch
Erscheinungsjahr: 2013
SWD-Schlagwörter: Proteine
Array
Chip
Eukaryontische Zelle
Klonierung
Impedanz
Biologika
Freie Schlagwörter: protein
array
chip
eukaryotic cells
cloning
impedance
biopharmaceuticals
DDC-Sachgruppe: 620 Ingenieurwissenschaften und Maschinenbau
Dokumentart : Dissertation
Kurzfassung: Gegenstand dieser Arbeit ist der Entwurf und Aufbau eines neuartigen Systems, das in der Lage ist eukaryotische Zellen durch einen zellulären Multiparameterdatensatz zu beschreiben und eine Zellklonierung zu ermöglichen. Die Eignung des Systems für die Selektion von hoch-produzierenden Zellen für die Herstellung therapeutischer Proteine wurde mittels eines Protein-exprimierenden und Antikörper-sekretierenden Zelltestsystems geprüft. Als Referenz diente das Durchflusszytometer mit Sortiereinheit, die magnetische Zellseparation, halbfeste Zellkulturmedien mit Pickeinheiten und Verdünnungsreihen. Die Zellen konnten parallel, mit einer hohen Vereinzelungseffizienz, ohne Minderung der Zellvitalität mittels einer entwickelten Positionierungstechnik auf einem Chip separiert werden. Die separierten Zellen konnten anhand der erfassten optischen und elektrischen Signale auf ihre Vitalität, Produktivität und Proliferation untersucht werden. Um auch die produzierte Menge eines Sekrets erfassen zu können, wurde der implementierte Chip mit höherviskosen Medien kombiniert, um die Diffusionsstrecke der Antikörper zu minimieren. Der Chip bietet die Möglichkeit einer on-chip Zellproliferation. Dies erlaubt die Entnahme größerer Zellpopulationen, wodurch sich die Zellklonierungseffizienz erheblich steigern ließ. Es konnte erfolgreich gezeigt werden, dass speziell bei zellulären Produktionssystemen der Einsatz des hier entwickelten Selektionssystems die Ausbeute beträchtlich steigern konnte was vor allem bei der Herstellung therapeutischer Proteine einen immensen Fortschritt darstellt.
Subject of this work is the design and implementation of a novel system, which separates eukaryotic cells from each other on a chip platform. Further to separation it allows cellular multi-parameter characterization and cell isolation. The suitability of the system for the selection of high-productive cells for the fabrication of therapeutical proteins is proven by a protein-producing and antibody-secreting cell line. The cells could be successfully singularised on the chip platform by the developed positioning technique with a high efficiency and without decreasing cell viability. The viability, productivity and the proliferation of the singularized cells could be characterized based on optical and electrical signals. To allow the detection of the antibody secretion, the chip system is combined with semi-solid media to minimise antibody diffusion through the media. Cell cloning was successfully performed by a microcapillary mounted onto a micromanipulator. An increasing in the cell cloning efficiency could be achieved by the selection of a whole cell clone. Therefore the chip was expanded by a chip-based proliferation. It could be successfully shown, that using the developed system for cellular production systems could increase the productivity which is a great development in the fabrication pipeline of therapeutical proteins.
Link zu diesem Datensatz: urn:nbn:de:bsz:291-scidok-55250
hdl:20.500.11880/22956
http://dx.doi.org/10.22028/D291-22900
Erstgutachter: Fuhr, Günter R.
Tag der mündlichen Prüfung: 26-Sep-2013
SciDok-Publikation: 4-Okt-2013
Fakultät: Fakultät 7 - Naturwissenschaftlich-Technische Fakultät II
Fachrichtung: NT - Systems Engineering
Ehemalige Fachrichtung: bis SS 2016: Fachrichtung 7.4 - Mechatronik
Fakultät / Institution:NT - Naturwissenschaftlich- Technische Fakultät

Dateien zu dieser Ressource:
Datei Beschreibung GrößeFormat 
Konzipierung_und_Charakterisierung_Diss_CKurz_duplex_2013_10_01.pdf5,25 MBAdobe PDFÖffnen/Anzeigen


Alle Ressourcen in diesem Repository sind urheberrechtlich geschützt.